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孔雀石綠和結(jié)晶紫是一類三苯甲烷類染料，zui先應(yīng)用在紡織工藝，因其具有消毒和殺菌作用而被廣泛應(yīng)用于水產(chǎn)品的養(yǎng)殖過程中。由于孔雀石綠和結(jié)晶紫具有高毒、高殘留和致癌、致畸、致突變等特點(diǎn)，當(dāng)其進(jìn)入生物體內(nèi)，會(huì)產(chǎn)生具有更強(qiáng)危害的隱色孔雀石綠和隱色結(jié)晶紫。因此，包括中國在內(nèi)的許多國家都將其列為水產(chǎn)養(yǎng)殖中的禁用藥物。

目前國內(nèi)外檢測(cè)孔雀石綠、結(jié)晶紫的分析方法有氣相色譜質(zhì)譜法、液相色譜法和液相色譜-質(zhì)譜法，同時(shí)國內(nèi)檢測(cè)此類藥物的標(biāo)準(zhǔn)方法有《GB/T 19857-2005 水產(chǎn)品中孔雀石綠和結(jié)晶紫殘留量的測(cè)定》、《SN/T 1768-2006 水產(chǎn)品中孔雀石綠和結(jié)品紫及其代謝產(chǎn)物的快速測(cè)定方法》等。

方法優(yōu)勢(shì)：

本方法基于QuEChERS方法原理，采用酸化乙腈提取，QuEChERS凈化，通過UPLC-MS/MS檢測(cè)。

1. 方法前處理過程簡單、方便，并能同時(shí)檢測(cè)孔雀石綠，無色孔雀石綠，結(jié)晶紫，無色結(jié)晶紫；

2. 適合水產(chǎn)品和飼料樣品的檢測(cè)，節(jié)省時(shí)間，降低基質(zhì)效應(yīng)，回收率達(dá)80%以上；

3. 本方案4種化合物的方法定量限均為0.5 μg/kg，同國標(biāo)方法《GB/T 19857-2005 水產(chǎn)品中孔雀石綠和結(jié)晶紫殘留量的測(cè)定》一致，可供廣大分析工作者使用。

以下為詳細(xì)解決方案，敬請(qǐng)參考！

水產(chǎn)品和飼料中孔雀石綠和結(jié)晶紫及其代謝物殘留量的測(cè)定——UPLC-MS/MS法

1、適用范圍

適用于魚、蝦、貝、蟹等水產(chǎn)品及其飼料中孔雀石綠、結(jié)晶紫、隱色結(jié)晶紫、隱色孔雀石綠的測(cè)定，本方法定量限為0.5 μg/kg。

2、提取

稱2.0 g樣品于50 mL離心管中，加入2.0 g氯化鈉，攪勻，加20 mL 1%甲酸乙腈，渦旋混合1 min，振蕩10 min，6000 rpm下離心2 min，取 10 mL上清液待凈化。

3、凈化——ProElut QuE 15 mL Tube - AOAC (Cat#：64506)

1. 將10 mL 提取液轉(zhuǎn)移到15 mL凈化管中，振蕩5 min，6000 rpm下離心2 min；

2. 取上清液5 mL，40 ℃減壓蒸干，用流動(dòng)相重新溶解，過微孔濾膜后供LC-MS/MS分析。

備注：同方法制備基質(zhì)匹配標(biāo)準(zhǔn)溶液。

4、分析條件

4.1 UPLC 條件：

色譜柱：LeapsilC18，100 × 2.1 mm，2.7 μm (Cat#：86005)

流  速：0.3 mL     進(jìn)樣量：5 μL      柱  溫：35 ℃

流動(dòng)相： A：5 mmol/mL乙酸銨 + 0.2%乙酸    B：乙腈    A：B=15：85

4.2 質(zhì)譜條件：

定性離子對(duì)、定量離子對(duì)、碰撞氣能量及去簇電壓見下表

5、添加回收結(jié)果

水產(chǎn)品和飼料中孔雀石綠、結(jié)晶紫、隱色結(jié)晶紫、隱色孔雀石綠的LC-MS/MS檢測(cè)添加回收結(jié)果

孔雀石綠、結(jié)晶紫、隱色孔雀石綠和隱色結(jié)晶紫0.5 μg/L MRM色譜圖

孔雀石綠0.5 μg/L XIC色譜圖

結(jié)晶紫0.5 μg/L XIC色譜圖

隱色孔雀石綠0.5 μg/L XIC色譜圖

隱色結(jié)晶紫0.5 μg/L XIC色譜圖

水產(chǎn)品和飼料中孔雀石綠和結(jié)晶紫及其代謝物殘留量的測(cè)定相關(guān)產(chǎn)品信息：

紅色產(chǎn)品貨號(hào)#30039、#30040、#1034、#1035*